一、服務(wù)簡介

       細胞在發(fā)生凋亡時，會激活一些DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測，可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder?；蚪MDNA斷裂時，暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC) 標(biāo)記的dUTP (fluorescein-dUTP) ，從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測，這就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法檢測細胞凋亡的原理。   

二、技術(shù)流程

1、TUNEL-熒光顯色：

基因組DNA斷裂時，暴露的3’-OH在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上熒光素 (如FITC) 標(biāo)記的dUTP(fluorescein-dUTP)，從而通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行凋亡檢測。

2、 TUNEL-DAB顯色：

基因組DNA斷裂時，暴露的3'-OH在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上生物素(Biotin)標(biāo)記的dUTP(Biotin-dUTP)，隨后和辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的Streptavidin (Streptavidin-HRP)結(jié)合，最后在HRP的催化下通過DAB顯色來顯示凋亡細胞，從而通過普通光學(xué)顯微鏡檢測到凋亡的細胞 。

1、待測組織樣本石蠟切片，常溫運輸；冰凍切片，干冰運輸；如需我司切片，則石蠟切片及冰凍切片需分別提供多聚甲醛固定的樣本4℃冰袋運輸或新鮮樣本干冰運輸。

2、準(zhǔn)備待測樣品制備組織切片或細胞爬片，并根據(jù)所選顯色檢測方法進行TUNEL檢測凋亡

3、顯色結(jié)果拍片，分析并整理結(jié)果報告。

4. 實驗周期：1-2周；

5. 若另有疑問歡迎向本公司咨詢，我們將竭誠為您服務(wù)。 

四、成果展示

五、詢價及訂購

感謝您選擇我公司的Tunnel檢測細胞凋亡服務(wù)。如有相關(guān)問題請聯(lián)系我們的工作人員。